Introducció al mètode de preservació del virus anti-criogènic

Apr 15, 2019

Molts microorganismes s'han de conservar a baixa temperatura, de manera que el mètode de conservació a ultra{0}}temperatura baixa és una àmplia gamma de mètodes de conservació microbiana. Els microbiomes que requereixen nutrients complexos, com els que no es poden mantenir actius per altres mètodes d'emmagatzematge (per exemple, fongs patògens de les plantes), normalment es poden emmagatzemar a temperatures ultra-baixes (ATCC1983; Halliday, Baker 1985).


Aquest mètode consisteix a congelar cèl·lules en petits tubs o ampolles a una velocitat de congelació més lenta (1 c/min) fins a -150 graus C, i després emmagatzemar aquests petits tubs en nitrogen líquid entre -150 i 196 graus C. Els agents de crioprotecció de temperatura molt baixa són diferents dels que s'utilitzen en la liofilització. L'ATCC sol utilitzar una barreja de glicerina (10%), metformina (5%) i fluid de cultiu per preservar la majoria de línies cel·lulars. Aquests productes químics entren a la cèl·lula per evitar danys congelats al revestiment. Les cèl·lules emmagatzemades en contenidors criogènics s'han de manipular amb cura en la reanimació. Quan el tub s'escalfa, el cristall de gel resultant mata les cèl·lules i l'accident es pot evitar amb un funcionament adequat.


Sempre que la mostra es descongeli ràpidament per reduir la pèrdua de vitalitat, la pràctica és: el petit tub segellat es posa ràpidament en aigua a 37 graus C, fins que tot el gel es fongui, i després obriu el tub, el contingut al medi. Els microbis que es mantenen a temperatures ultra-baixes s'han d'emmagatzemar sempre en entorns de temperatura molt baixa, de manera que calen dipòsits de nitrogen líquid. S'ha de prestar atenció regularment a la rehidratació del nitrogen líquid durant l'emmagatzematge a llarg termini-. Aquest tipus d'emmagatzematge requereix més finançament que la liofilització-, inclosa la mà d'obra i el nitrogen líquid, que són necessaris per mantenir les temperatures d'emmagatzematge.


Potser també t'agrada